南京地铁2号线是南京地铁第二条建成运营的线路，于2010年5月28日正式运营，标志色为红色。
地铁2号线途径建邺区、鼓楼区、秦淮区、玄武区和栖霞区，线路西起油坊桥站，北上经河西新城，向东转入主城中心，南绕紫金山，进入仙林大学城，东至经天路站。延伸至鱼嘴站的西延工程已进入前期准备阶段，将于2017年底前全面开工。
地铁2号线全长37.95千米，其中地下线22.15千米、地面线和高架线15.8千米;共设置26座车站，其中地下站17座、地面站2座、高架站7座;列车采用6节编组A型列车，由中国南车南京浦镇车辆有限公司和法国阿尔斯通公司联合制造。
截至2017年3月，南京地铁2号线日均客流77万人次。2017年4月28日的89.6万人次为地铁2号线最高单日线路客运量。
南京地铁2号线的艺术设计以中国的传统节日为主题，在主要车站设有主题文化墙，运用雕塑、壁画等多种艺术形式体现地铁2号线的文化主题。
安全门
南京地铁2号线的19座地下车站和地面车站使用全高安全门(上半部分是钢化玻璃，下半部分是斜栅栏)，7座高架车站使用半高安全门(全钢化玻璃)，由美国西屋公司制造。
地铁2号线列车
南京地铁2号线采用的地铁车辆是世界比较先进的A型(M系列)宽体列车，行走制式为钢轮钢轨，轨距为1.435米，每节车厢每侧各5扇塞拉式车门。列车以红色为主色调，为6节编组A型车，采用4动2拖方式编组，单节载客量310人，整列载客量1860人。
地铁2号线车辆与1号线相同，并在1号线列车的基础上进行了技术升级，全部由浦镇车辆厂生产制造，由南京浦镇车辆公司和法国阿尔斯通公司合作生产，是地铁车辆家族中载客量最大的一种，这种列车每节长24.4米，宽3米，高3.8米，每列编组为6辆，是世界上流行的一种，正被亚洲的新加坡等地采用。
服务网点
充值网点：马群站、孝陵卫站、明故宫站、莫愁湖站、元通站(充值时间为：8:00-11:00;11:30-18:30)
综合业务点：学则路站、西安门站、新街口站、汉中门站、兴隆大街站(服务时间为：8:00-11:30;12:00-17:30)
自助营业机：全线所有站点均有(服务时间为：0:00-24:00)
注：充值网点提供充值服务和购买充值卡服务;综合服务点提供充值、售卡、学生卡**和年检、过期卡激活、记名卡挂失、市民卡开卡等业务。
地铁商业
南京地铁2号线拥有16个站点开放了地铁商铺区域有零售业餐饮业等商业，分别是：油坊桥站、雨润大街站、元通站、奥体东站、兴隆大街站、集庆门大街站、云锦路站、新街口站、大行宫站、明故宫站、孝陵卫站、钟灵街站、金马路站、仙鹤门站、仙林中心站、南***林校区站。
其中，南***林校区站已于2010年9月1日试运营，南京地铁2号线新街口站商铺也于2010年10月1日国庆节当天开放运营。
南京地铁2号线学则路站公共自行车
从2010年9月3日起，南京地铁2号线学则路、仙林中心地铁站开始**公共自行车借用登记工作，地铁2号线的公共自行车是红色的，前有车篓方便携带物品，南京成全国靠前在地铁线投放公共自行车城市。
公共自行车车胎全部为实心胎，既方便使用者又便于管理维护，每个停车点都设置了20个停车位，附近还有专人值守。
一期仙林公共自行车点是6个分别是：学则路、学则路华润苏果、仙林中心、仙林中心金鹰购物中心、南京师范大学仙林校区、南京财经大学仙林校区停车点。
2011年11月，仙林新增14个公共自行车租赁点，分别是：南京邮电学院(2个)、南京理工大学紫金学院(2个)、南京信息技术学院(1个)、中北学院(1个)、南京工业职业技术学院(1个)、南京外国语学校仙林分校(2个)、山水风华小区(1个)、诚品城(1个)、宜人酒店(1个)、鸿运家园(1个)、香樟园(1个)。
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